初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo):免疫原的制備
初級(jí)檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo):免疫原的制備
免疫原的制備
(1)顆粒性抗原的制備:顆粒性抗原有各種細(xì)胞、細(xì)菌、寄生蟲等。細(xì)胞抗原:一般情況下經(jīng)生理鹽水或其他溶液洗凈,配制一定濃度即可;顆粒性抗原大多用靜脈內(nèi)注射免疫法,較少作皮內(nèi)注射。
(2)可溶性抗原制備
?、俳M織和細(xì)胞粗抗原的制備:破碎方法:機(jī)械破碎法、超聲破碎法、酶處理法、自溶法和表面活性劑??扇苄钥乖兓椒ǎ撼匐x心分離法、選擇沉淀法、凝膠過濾法、離子交換層析法和親和層析法。
?、诿庖咔虻鞍灼蔚闹苽洌何宸N免疫球蛋白分解成片段作為免疫原制備出分辨力更高的特異性抗血清。
?、奂兓乖蔫b定:主要對(duì)純化抗原的含量、理化性質(zhì)、純度及免疫活性進(jìn)行鑒定。
(3)半抗原性免疫原的制備
?、侔肟乖耗澄镔|(zhì)在獨(dú)立存在時(shí)只具有反應(yīng)原性而無免疫原性,這些物質(zhì)稱為半抗原。如分子量小于4000的有機(jī)物質(zhì)。半抗原與蛋白質(zhì)載體或高分子聚合物結(jié)合后才有免疫原性。
?、谳d體的選擇:蛋白質(zhì)類、多肽類聚合物(常用多聚賴氨酸)、大分子聚合物和某些顆粒(聚乙烯吡咯烷酮、活性炭、羧甲基纖維素等)。
?、郯肟乖?載體聯(lián)接方法:碳二亞胺法、戊二醛法和氯甲酸異丁酯法。一般認(rèn)為應(yīng)連接20個(gè)以上半抗原才能使動(dòng)物有效產(chǎn)生抗體。
(4)免疫佐劑:是指與抗原同時(shí)或預(yù)先注射于機(jī)體能增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)。
?、僮魟┓N類:
具備免疫原性的佐劑:如卡介苗、枯草分枝桿菌、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、脂多糖、細(xì)胞因子等。
不具備免疫原性的佐劑:如氫氧化鋁佐劑、磷酸鋁、石蠟油等。應(yīng)用最多是福氏佐劑、細(xì)胞因子佐劑。
?、谧魟┑淖饔茫褐饕饔檬窃鰪?qiáng)免疫原性、增加抗體的滴度和引起或增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。
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