初級檢驗技師輔導:單克隆抗體的制備技術
更新時間:2010-11-16 15:26:29
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初級檢驗技師輔導:單克隆抗體的制備技術
單克隆抗體的制備技術
(1)單克隆抗體的產生:它主要通過動物體內誘生方法和體外培養(yǎng)方法進行培養(yǎng)產生的。
(2)單克隆抗體的純化:常用的方法有鹽析、凝膠過濾、離子交換層析和辛酸提取等方法。
(3)單克隆抗體性質鑒定:常用的方法有放免測定,補體介導溶血試驗,ELISA,免疫酶,玫瑰花結形成試驗等,最常用的為ELISA方法。
4.基因工程抗體技術
(1)人源化抗體:如人—鼠嵌合抗體和抗體的表面修飾,使Fv表面人源化。
(2)小分子抗體:可在大腸桿菌等原核細胞表達,在人體內穿透力強,有利于疾病的治療。
(3)抗體融合蛋白:將抗體分子片段與其他蛋白融合,得到多樣性生物功能的融合蛋白。
(4)雙特異性抗體:能同時結合兩種抗原,可介導標記物與靶抗原結合或某些效應因子定位于靶細胞。
(5)抗體庫技術:是指將全套抗體重鏈及輕鏈可變區(qū)基因克隆出來,篩選到特異的可變區(qū)基因。
例題(多選):在雜交瘤技術中細胞融合的選擇培養(yǎng)基有三種關鍵成分:
A. 氨甲蝶呤 B. 次黃嘌呤 C.胞嘧啶 D. 胸腺嘧啶核苷
答案:ABD
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