初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：微生物學(xué)檢查方法

　　初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo)：微生物學(xué)檢查方法

　　微生物學(xué)檢查方法與原理

　　1、標(biāo)本采集：根據(jù)鏈球菌感染所致疾病不同，可采集濃汁、咽拭、痰、血、尿等標(biāo)本。

　　2、檢驗(yàn)方法及鑒定：

　　(1)直接鏡檢：革蘭染色，如符合鏈球菌的形態(tài)特征可初報(bào)。

　　(2)直接檢測(cè)抗原。

　　(3)分離培養(yǎng)：血液標(biāo)本，以無(wú)菌操作取兩份血液各8-10ml，分別注入肉湯培養(yǎng)基，分別置氧和厭氧環(huán)境中增菌，有細(xì)菌生長(zhǎng)，再分別接種于兩個(gè)血平板，置需氧和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。濃汁和咽拭標(biāo)本接種血平板并涂片染色鏡檢，若形態(tài)酷似鏈球菌，并革蘭陽(yáng)性，可初報(bào)。上述的培養(yǎng)物經(jīng)35℃18-24小時(shí)培養(yǎng)后，觀察菌落特征和溶血情況。鏈球菌的菌落通常較小，透明或半透明，似針尖大小、凸起，菌落周?chē)沙霈F(xiàn)α-溶血或β-溶血，也可不出現(xiàn)溶血。然后取可疑菌落經(jīng)涂片、染色鏡檢證實(shí)。甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌可產(chǎn)生α-溶血，它們的菌落形態(tài)非常相似，應(yīng)以區(qū)別。

　　(4)鑒定

　　1)膽汁七葉苷試驗(yàn)：因D鏈球菌能在40%膽汁培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，并可分解七葉苷，使培養(yǎng)基變黑。

　　2)Optochin敏感性試驗(yàn)：幾乎所有的肺炎鏈球菌株都對(duì)Optochin敏感，而其他鏈球菌通常不被其所抑制。

　　3)馬尿酸鹽水解試驗(yàn)：B群鏈球菌具有馬尿酸酶，使馬尿酸水解。

　　4)CAMP試驗(yàn)：羊血平板上B群鏈球菌與金葡菌協(xié)同形成箭頭狀溶血。

　　5)桿菌肽酶敏感試驗(yàn)：化膿型鏈球菌為陽(yáng)性。

　　6)血清分群分型。

　　7)豬鏈球菌檢測(cè)：用API20Strep生化鑒定系統(tǒng)鑒定，血清學(xué)分群分型。采用PCR技術(shù)檢測(cè)豬鏈球菌毒力基因MRP及EF，PCR檢測(cè)編碼谷氨酸脫氫酶的基因片斷。

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