初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):免疫組織化學(xué)技術(shù)特點(diǎn)
初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):免疫組織化學(xué)技術(shù)特點(diǎn)
免疫組織化學(xué)技術(shù)特點(diǎn)
(1)標(biāo)本的處理:①標(biāo)本主要來源:組織標(biāo)本主要取之于活組織檢查標(biāo)本、手術(shù)切除標(biāo)本、動(dòng)物模型標(biāo)本以及尸體解剖標(biāo)本等。組織取材時(shí)應(yīng)注意許多要求。
?、跇?biāo)本的固定與保存:標(biāo)本離體后應(yīng)立即速凍成凍塊進(jìn)行冰凍切片,或立即用固定液固定進(jìn)行脫水、浸蠟、包埋、石蠟切片等過程。如不能迅速制片,可貯存于液氮罐內(nèi)或-70℃冰箱內(nèi)備用。
(2)抗體的處理與保存:抗體是免疫組織化學(xué)技術(shù)的首先試劑,如自制的異種抗血清,可用特異性抗原進(jìn)行親和層析,去除非特異性抗體,或?qū)⒖贵w稀釋處理。
(3)免疫染色:通常的程序是①標(biāo)記抗體與標(biāo)本中抗原反應(yīng)并形成抗原抗體復(fù)合物;②用緩沖液沖洗去未結(jié)合的成分;③鏡下觀察結(jié)果。
(4)設(shè)立對(duì)照試驗(yàn):為了保證免疫熒光組織化學(xué)染色的準(zhǔn)確性,在實(shí)驗(yàn)中必須設(shè)置對(duì)照。通常是針對(duì)第一抗體設(shè)立對(duì)照,包括陽性對(duì)照、陰性對(duì)照、替代對(duì)照、自身對(duì)照和吸收試驗(yàn)等。
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