初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):細(xì)胞黏附分子的測(cè)定
更新時(shí)間:2011-01-28 10:26:51
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初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):細(xì)胞黏附分子的測(cè)定 $lesson$
細(xì)胞黏附分子的測(cè)定技術(shù)
同學(xué)們應(yīng)重點(diǎn)掌握:1.細(xì)胞表面黏附分子的測(cè)定: 2.可溶性黏附因子的測(cè)定: 3.了解臨床應(yīng)用
白細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞等以及血液中均存在細(xì)胞粘附分子。按其結(jié)構(gòu)特點(diǎn),分有鈣離子依賴性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和選擇素家族四大類。
1.細(xì)胞表面粘附分子的檢測(cè)
(1)放射免疫測(cè)定法:通常用抗細(xì)胞粘附分子抗體包被載體,加受檢樣品后,繼加相應(yīng)單克隆抗體和同位素標(biāo)記的二抗作非競(jìng)爭(zhēng)性固相放射免疫測(cè)定法。
(2)熒光免疫測(cè)定法:用不同激發(fā)波長(zhǎng)的熒光素著染色受檢細(xì)胞,在FACS儀上可同時(shí)檢測(cè)有兩種不同的細(xì)胞粘附分子。
(3)酶免疫測(cè)定法:主要為雙抗體夾心ELISA,本法應(yīng)用最廣,但僅能檢出一群細(xì)胞的表面粘附分子數(shù)量,而不能反映單個(gè)細(xì)胞粘附分子數(shù)量的變化。
(4)其他方法:如酶免疫組織化學(xué)測(cè)定、流式細(xì)胞儀分析、時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定等。
2.可溶性粘附分子的檢測(cè):多采用雙抗體夾心ELISA,研究最多的選擇素家族和免疫球蛋白超家族。前者有E、L、P三型,均可見血液中。
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