初級(jí)檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo)：微生物學(xué)檢查

　　初級(jí)檢驗(yàn)技士考試輔導(dǎo)：微生物學(xué)檢查 $lesson$

　　微生物學(xué)檢查

　　1、標(biāo)本采集：根據(jù)不同疾病采集不同標(biāo)本，血液、尿液、糞便及食物。腸熱癥的第1、2周取血液，第2、3周取糞便與尿液。整個(gè)病程中骨髓分離細(xì)菌陽(yáng)性率較高。食物中毒采集食物與糞便。

　　2、檢驗(yàn)方法及鑒定

　　1、直接檢測(cè)：商品膠乳凝集試劑，快速檢出沙門(mén)菌和志賀菌。

　　2、分離培養(yǎng)：

　　1)糞便：一般將糞便或肛拭直接接種于SS和麥康凱平板上，用兩種培養(yǎng)基的目的是提高標(biāo)本的陽(yáng)性檢出率。

　　2)血液和骨髓：抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml，立即接種于含0.5%膽鹽肉湯或葡萄糖肉湯5ml試管中進(jìn)行增菌，48小時(shí)將培養(yǎng)物移種到血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基上，若有細(xì)菌生長(zhǎng)取菌涂片革蘭染色并報(bào)告結(jié)果。對(duì)增菌培養(yǎng)物連續(xù)培養(yǎng)7天，仍無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)，則報(bào)告陰性。

　　3)尿液：取尿液2-3ml經(jīng)硫磺酸鹽肉湯增菌后，再接種于腸道菌選擇培養(yǎng)基或血平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)，亦可將尿液離心沉淀物分離培養(yǎng)。

　　4)局部感染的膿液。

　　3、鑒定：沙門(mén)菌屬的鑒定與志賀菌屬相同，須根據(jù)生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定兩方面進(jìn)行。

　　(1)初步鑒定：如為革蘭陰性桿菌時(shí)作氧化酶試驗(yàn)，陰性時(shí)，挑取可疑菌落分別接種于KIA和MIU上，并作生化反應(yīng)。以沙門(mén)菌多價(jià)診斷血清作玻片凝集試驗(yàn)。

　　凡符合KIA：K/A、產(chǎn)氣+/-、H2S+/-、MIU：動(dòng)力+、吲哚-、脲酶+、氧化酶-，觸酶+，硝酸鹽還原+，以沙門(mén)菌多價(jià)血清作玻片凝集試驗(yàn)陽(yáng)性，鑒定為沙門(mén)菌屬。

　　(2)最后鑒定：沙門(mén)菌血清學(xué)鑒定主要借助于沙門(mén)菌O抗原多價(jià)血清與O、H、Vi抗原的單價(jià)因子血清。甲型副傷寒沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)菌和傷寒沙門(mén)菌分別屬于A、B、D血清型。

　　(3)血清學(xué)診斷：肥達(dá)試驗(yàn)：用已知的傷寒沙門(mén)菌O、H抗原，副傷寒沙門(mén)菌甲、乙H抗原稀釋后，與被檢血清作定量凝集試驗(yàn)，以檢測(cè)患者血清中抗體的含量，來(lái)判斷機(jī)體是否受沙門(mén)菌感染而導(dǎo)致腸熱癥，并判斷沙門(mén)菌的種類(lèi)。

　　菌體抗原(O抗原)――顆粒狀凝集

　　鞭毛抗原(H抗原)――絮狀凝集

　　一般傷寒O>1:80;H>1:160有臨床意義;

　　副傷寒A、B、C>1:80有臨床意義

　　若第二次效價(jià)比第一次高4倍以上具有診斷價(jià)值。

　　O抗原為IgM，出現(xiàn)早，持續(xù)存在時(shí)間較短。

　　H抗原為IgG出現(xiàn)較遲，持續(xù)存在時(shí)間較長(zhǎng)。

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