初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：糞便化學(xué)法隱血試驗(yàn)
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初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：糞便化學(xué)法隱血試驗(yàn) $lesson$
化學(xué)檢查
一 、隱血試驗(yàn)
隱血是指消化道出血量很少，肉眼不見(jiàn)血色，而且少量紅細(xì)胞又被消化分解放致顯微鏡下也無(wú)從發(fā)現(xiàn)的出血狀況而言。
[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 隱血試驗(yàn)(occult blood test,OBT)
1、 目前主要采用化學(xué)法
如鄰聯(lián)甲苯胺法、還原酚酞法、聯(lián)苯胺法、匹拉米洞法,無(wú)色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法等。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理 基本于血紅蛋白中的含鐵血紅素部分有催化過(guò)氧化物分解的作用，能催化試劑中的過(guò)氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化上述色原物質(zhì)而呈色。呈色的深淺反映了血紅蛋白多少，亦即出血量的大小。
靈敏度 以上試驗(yàn)方法雖然原理相同，但在實(shí)際應(yīng)用中卻由于糞便的成分差別很大，各實(shí)驗(yàn)室具體操作細(xì)節(jié)如糞便取材多少，試劑配方、觀察時(shí)間等不同，而使結(jié)果存在較大差異。
多數(shù)文獻(xiàn)應(yīng)用稀釋度的血紅蛋白液對(duì)這些方法靈敏度的研究表明，鄰甲苯胺法、還原酚酞法最靈敏，可檢測(cè)出0.2-1mg/L的血紅蛋白，只要消化道有1-5ml的出血就可檢出。
還原酚酞法由于試劑極不穩(wěn)定，放置可自發(fā)氧化變紅而被摒棄。
高度靈敏的鄰聯(lián)甲苯胺法常容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，中度靈敏的試驗(yàn)包括聯(lián)苯胺法、無(wú)色孔雀綠法，可檢出1-5mg/L的血紅蛋白，消化道有5-10ml出血即為陽(yáng)性。
聯(lián)苯胺法由于有致癌作用而無(wú)色孔雀綠法在未加入異喹啉時(shí)靈敏度差，需(6-10mg/L血紅蛋白，)試劑配制和來(lái)源均不如匹拉米洞方法方便。愈創(chuàng)木酯法靈敏度低，需6-10 mg /L血紅蛋白才能檢出，此時(shí)消化道出血可達(dá)20ml。但假陽(yáng)性很少，如此法為陽(yáng)性，基本可確診消化道出血。
目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)應(yīng)用四甲基聯(lián)苯胺和愈創(chuàng)木酯為顯色基質(zhì)的隱血試帶，使隱血試驗(yàn)更為方便，但未根本解決隱血試驗(yàn)方法學(xué)中的問(wèn)題。
以上各種隱血試驗(yàn)化學(xué)法雖簡(jiǎn)單易行，但均基于血紅蛋白中的血紅素可促使雙氧水分解釋放新生態(tài)氧，使色原物質(zhì)氧化這一原理，方法上缺乏特異準(zhǔn)確性。此外化學(xué)試劑不穩(wěn)定，久置后可使反應(yīng)減弱。外源性動(dòng)物儀器如含有血紅蛋白，肌紅蛋白、其血紅素的作用均可使試驗(yàn)呈陽(yáng)性，大量生食蔬菜中含有活性的植物過(guò)氧化物酶也可催化雙氧水分解，出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，所以除愈創(chuàng)木酯法外均要求素食3天，為此有人提出將糞便用水作1：3稀釋加熱煮沸再加冰乙酸和乙醚提取血紅蛋白測(cè)定可排除干擾。此法雖然可靠，但不適用于常規(guī)工作。加上血液如在腸道停留過(guò)久，血紅蛋白被細(xì)菌降解，血紅素不復(fù)存在，則會(huì)出現(xiàn)與病情不符的陰性結(jié)果，病人服用大量維生素C或其它具有還原作用的藥物，此實(shí)驗(yàn)中可使過(guò)氧化物還原，不能再氧化色原物質(zhì)，亦可使隱血試驗(yàn)呈假陰性。除上述干擾隱血試驗(yàn)，亦可由于檢驗(yàn)人員取材部位不同，標(biāo)本反應(yīng)時(shí)間不同，檢驗(yàn)員對(duì)顯色判斷不同，故在不同一方法的試驗(yàn)中，還可產(chǎn)生誤差等，致使目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一公認(rèn)的推薦的方法，更談不到實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。
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