2013年初級檢驗技士免疫檢驗:白細胞的分離
更新時間:2012-10-12 17:18:57
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(一)血液中紅細胞與白細胞比例約600~1000:1,兩者的比重不同其沉降速度亦異,通常用兩種方法加以分離。
本法是利用血細胞自然沉降率的分離法,采集血液后應及時抗凝,通常選用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,從而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白而防止血液凝固。操作原則是將含抗凝血的試管直立靜置室溫30~60min后,血液分成明顯三層,上層為淡黃色血漿,底層為紅細胞,緊貼紅細胞層上面的灰白層為白細胞,輕輕吸取即得富含白細胞的細胞群,離心洗滌后加入少量蒸餾水或含氯化銨的Gey溶液,經短時間的低滲處理,使紅細胞裂解,經過反復洗滌可得純度較高的白細胞懸液。
(二)聚合物加速沉淀法
本法是利用高分子量的聚合物如明膠、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮(polyvinylpyrolidone,PVP)等使紅細胞凝集成串,加速紅細胞沉降,使之與白細胞分離。本法的細胞獲得率比自然沉降法高。
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