2013初級(jí)檢驗(yàn)技師（微生物與寄生蟲(chóng)）：寄生蟲(chóng)感染后實(shí)驗(yàn)室診斷

    點(diǎn)擊進(jìn)入：2013年初級(jí)檢驗(yàn)技師考試：微生物與寄生蟲(chóng)知識(shí)點(diǎn)匯總

　　1.免疫學(xué)檢查

　　有些寄生蟲(chóng)病難以根據(jù)癥狀或體征及病原檢查作出診斷，此時(shí)需采取免疫學(xué)方法輔助診斷。在感染早期、輕度感染、單性感染(僅有雄蟲(chóng))、隱性感染或由于特殊的寄生部位而使病原檢查十分困難以及在流行病學(xué)研究中，免疫診斷具有突出的優(yōu)點(diǎn)。所用的抗原包括同種抗原、生活史某期特異性抗原或基因工程抗原。根據(jù)反應(yīng)原理分為皮內(nèi)反應(yīng)和血清學(xué)試驗(yàn)(沉淀反應(yīng)，凝集反應(yīng)和標(biāo)記反應(yīng))。檢測(cè)物質(zhì)包括特異性抗體、循環(huán)抗原、免疫復(fù)合物。近年來(lái)也有學(xué)者檢測(cè)細(xì)胞因子以了解機(jī)體的免疫狀態(tài)、抗蟲(chóng)感染的免疫機(jī)制或作為療效評(píng)價(jià)的參考。此外，嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)也可用于蠕蟲(chóng)感染的輔助診斷。上世紀(jì)70 年代以來(lái)，免疫學(xué)及免疫學(xué)技術(shù)取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展。近年發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)芯片技術(shù)可望為寄生蟲(chóng)感染的免疫診斷帶來(lái)又一技術(shù)突破。免疫診斷方法應(yīng)具有高度的特異性(specificity)、敏感性(sensitivity) 和可重復(fù)性(reproducibility)，同時(shí)應(yīng)具有簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快速且便于基層社區(qū)實(shí)驗(yàn)室操作等優(yōu)點(diǎn)。此外，理想的免疫學(xué)診斷還應(yīng)具有能夠判別現(xiàn)癥感染、估計(jì)感染度和療效考核的價(jià)值。

　　2.病原檢查

　　在寄生蟲(chóng)感染中，檢查出寄生蟲(chóng)病原體是確診的依據(jù)。根據(jù)臨床診斷提供的線索，通過(guò)標(biāo)本的采集、處理、檢驗(yàn)、分析等，做出明確結(jié)論，為臨床治療和流行病學(xué)調(diào)查提供可靠的依據(jù)。根據(jù)寄生蟲(chóng)的種類(lèi)、在人體的發(fā)育階段和寄生部位的不同可采集相應(yīng)的標(biāo)本(糞便、血液、陰道分泌物、尿液、痰液、組織活檢或骨髓穿刺等)，采取不同的檢查方法。對(duì)于肉眼可見(jiàn)的大部分蠕蟲(chóng)和節(jié)肢動(dòng)物，根據(jù)其標(biāo)本來(lái)源和形態(tài)特征可作出初步判斷，如糞便中的蛔蟲(chóng)、蟯蟲(chóng)、絳蟲(chóng)節(jié)片、組織中的蠅蛆等;對(duì)于原蟲(chóng)等肉眼無(wú)法見(jiàn)到的小型寄生蟲(chóng)，如阿米巴原蟲(chóng)、陰道毛滴蟲(chóng)、瘧原蟲(chóng)、各種蠕蟲(chóng)的卵、疥螨、蠕形螨等則須借助顯微鏡觀察。病原體檢查的質(zhì)量取決于檢驗(yàn)醫(yī)生的責(zé)任感和對(duì)寄生蟲(chóng)的形態(tài)、生活史、致病等基本知識(shí)和基本技能的掌握程度。

　　3.分子診斷

　　檢測(cè)的靶物質(zhì)為寄生蟲(chóng)基因組中特異性的DNA片段。例如根據(jù)堿基互補(bǔ)原理可設(shè)計(jì)并標(biāo)記DNA 探針(probe)進(jìn)行原位雜交(in situ hybridization);也可設(shè)計(jì)合成引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)，擴(kuò)增樣本中微量的DNA片段。將免疫檢測(cè)技術(shù)與基因擴(kuò)增技術(shù)嫁接而創(chuàng)立的PCR-ELISA ，用于瘧原蟲(chóng)的檢測(cè)，最低可測(cè)閾值為0.001%的原蟲(chóng)密度。本世紀(jì)之交發(fā)展起來(lái)的DNA 微陣列(DNA microarray)，或稱(chēng)DNA芯片(DNAchips)技術(shù)通過(guò)高通量、自動(dòng)化的DNA 雜交檢測(cè)，可在一張芯片上同時(shí)檢測(cè)成千上萬(wàn)個(gè)DNA 片段，將為包括寄生蟲(chóng)病在內(nèi)的感染性疾病和遺傳性疾病的基因診斷帶來(lái)一場(chǎng)革命。理論上， 檢測(cè)某種寄生蟲(chóng)的特異性DNA片段與檢測(cè)蟲(chóng)體具有同樣的診斷價(jià)值。

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