2012年檢驗(yàn)技士免疫檢驗(yàn)：T細(xì)胞抗原受體的證明

　　在80年代由于生物技術(shù)的發(fā)展，已能在體外建立抗原特異性T細(xì)胞克隆以及細(xì)胞和分子雜交技術(shù)的應(yīng)用，為在分子水平和基因水平研究T細(xì)胞受體的性質(zhì)創(chuàng)造了良好的條件。$lesson$

　　首先是應(yīng)用抗T細(xì)胞克隆型單克隆抗體結(jié)合免疫化學(xué)技術(shù)，Meur等人幾乎同時(shí)(1983)證實(shí)了小鼠和人T細(xì)胞表面抗原受體的存在，并分離出這種受體分子。研究其化學(xué)性質(zhì)，證明T細(xì)胞受體分子是由異二聚體肽鏈組成，由α和β鏈藉二硫鏈相連接在一起。通過對(duì)不同T細(xì)胞克隆受體肽圖的比較研究，發(fā)現(xiàn)二條肽鏈均具有與Ig肽鏈相似的可變區(qū)(V)和穩(wěn)定區(qū)(C)結(jié)構(gòu)。Reinherz等應(yīng)用抗人T細(xì)胞克隆抗體研究人T細(xì)胞受體也獲得了相似的結(jié)果。他將這種被克隆型單克隆抗體識(shí)別的T細(xì)胞表面分子稱為Ti分子，并證明它與抗原識(shí)別有關(guān)。故Ti分子被認(rèn)為是人T細(xì)胞表面的抗原識(shí)別受體。據(jù)此Reinherz于1984年提出了關(guān)于人T細(xì)胞抗原受體構(gòu)型設(shè)想，認(rèn)為T細(xì)胞抗原受體是由異二聚體組成的單一受體，能同時(shí)識(shí)別異種抗原分子和自己MHC分子。

　　對(duì)T細(xì)胞抗原受體研究的另一突破性進(jìn)展是應(yīng)用分子雜交技術(shù)分離出編碼T細(xì)胞受體的基因。Davis于1984年首先分離出小鼠T細(xì)胞受體的基因，并獲得了一個(gè)cDNA克隆(TM36)，從其預(yù)測(cè)的肽圖分析與經(jīng)免疫化學(xué)法分離的T細(xì)胞受體肽圖(β鏈)相一致，從而認(rèn)為它是鼠T細(xì)胞受體β鏈的基因。Yanagi等幾乎同時(shí)自人T細(xì)胞白血病株獲得一個(gè)cDNA克隆(YT35)，經(jīng)證明是人T細(xì)胞受體β鏈的基因。其后經(jīng)核苷酸序列分析證明T細(xì)胞β受體基因與Ig重鏈相似，亦由Vβ、Dβ、Jβ、及Cβ基因片段組成，也存在基因重排現(xiàn)象。但Orcia證明人β鏈基因定位于第17對(duì)染色體，鼠則定位于第6對(duì)染色體上。而編碼Ig的基因則定位于其它染色體上，所以編碼Ig的基因與T細(xì)胞受體基因是二組完全不同的基因。

　　Chien和Saito于1984年分別從小鼠T細(xì)胞中分離出編碼T細(xì)胞受體的另一組基因，即α基因，亦具有多樣性和重排現(xiàn)象。其編碼肽鏈也含有V區(qū)和C區(qū)。不難看出，應(yīng)用抗T細(xì)胞克隆型單克隆抗體對(duì)T細(xì)胞受體在蛋白質(zhì)分子水平的研究結(jié)果與用分子雜交技術(shù)在基因水平的研究結(jié)果是一致的。

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