2013年初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):全血硒檢查的原理
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(1)甲基百里香酚藍(lán)比色法(MTB):血清中的硒離子在堿性溶液中與甲基百里香酚藍(lán)(MTB)結(jié)合,生成一種藍(lán)色的絡(luò)合物。加入適量8-羥基喹啉,可消除鎂離子對(duì)測(cè)定的干擾,與同樣處理的硒標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較,求得血清總硒含量。
(2)鄰甲酚酞絡(luò)合酮直接比色法:鄰甲酚酞絡(luò)合酮(OCPC)是金屬絡(luò)合染料,也是酸堿指示劑,在pH11.0溶液中與硒螯合,生成紫紅色螯合物。作硒測(cè)定時(shí),在試劑中加入8-羥基喹啉以消除標(biāo)本中鎂離子的干擾。與同樣處理的鈣標(biāo)準(zhǔn)液比色,可求得血清硒含量。
(3)乙二胺四乙酸二鈉滴定法:標(biāo)本中硒離子在堿性溶液中與硒紅指示劑結(jié)合成為可溶性復(fù)合物,使溶液成淡紅色。乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-Na2)對(duì)硒離子的親和力很大,能與該復(fù)合物中的硒離子絡(luò)合,指示劑重新游離而使溶液呈現(xiàn)藍(lán)色。所以在滴定鈣時(shí),加入硒紅為淡紅色,用ED-TA-Na2滴定轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色時(shí),為滴定終點(diǎn)。與同樣處理的硒標(biāo)準(zhǔn)液滴定,計(jì)算出標(biāo)本中的硒的含量。
(4)離子硒測(cè)定:離子選擇電極是一種化學(xué)傳感器,它能將溶液中某種特定離子的活度轉(zhuǎn)變成電位信號(hào),然后通過儀器來測(cè)量。電極電位隨溶液中離子活度變化的關(guān)系服從Nernst方程。
選擇電極的電位(E)與溶液中被測(cè)離子活度的對(duì)數(shù)成線性關(guān)系。
血液抽出后,溶解于其中的CO2氣體會(huì)釋放到空氣中,使血液pH值變堿性,而血液pH值則與離子硒濃度之間成負(fù)相關(guān)的關(guān)系,pH值增加0.1,離子硒濃度約降低4%~5%.所以新型的離子型的離子硒分析儀都是在測(cè)定血清離子硒濃度的同時(shí),測(cè)量血清pH值,再計(jì)算出pH7.4時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)化離子硒(Se)濃度。
離子濃度分析儀通常采用比較法來測(cè)定樣品溶液中離子硒和pH值,即先測(cè)量二個(gè)已知濃度標(biāo)準(zhǔn)液中的離子硒和pH的電極電位,在儀器程序內(nèi)建立一條斜率曲線,然后測(cè)量樣品溶液中離子硒和pH的電極電位,從已建立的斜率曲線上求出樣品溶液中離子硒濃度和pH值,并計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)化離子硒濃度,直接在儀器上顯示出結(jié)果或打印出分析報(bào)告。
(5)同原子吸收分光光度法原理。
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