2013初級檢驗(yàn)技士免疫檢驗(yàn)：循環(huán)免疫復(fù)合物補(bǔ)體相關(guān)測定法

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　　IgG和IgM類抗體與抗原結(jié)合后，重鏈CH2區(qū)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，可以固定C1q并激活補(bǔ)體的系列反應(yīng)，這是利用補(bǔ)體有關(guān)技術(shù)檢測免疫復(fù)合物的基礎(chǔ)。

　　1.C1q結(jié)合試驗(yàn)：將待檢血清先行加熱56℃30min，以滅活其中的補(bǔ)體和破壞已與CIC結(jié)合的C1q，空出補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)。CIC與C1q的結(jié)合可用多種方法進(jìn)行檢測，常用的有以下3種。

　　(1)液相法：先將同位素標(biāo)記的C1q與滅活過的血清標(biāo)本混合作用，再加入0.5%(終濃度)的PEG將結(jié)合了C1q的CIC沉淀下來，通過檢測沉淀物中的放射活性來計(jì)算CIC的含量。

　　(2)固相法：先將C1q吸附于固相載體表面，加入待檢血清使CIC與C1q結(jié)合，再加入同位標(biāo)記的或酶標(biāo)記的抗人IgG或SPA，最后檢測其放射活性或酶活性。

　　(3)C1q偏離試驗(yàn)：先將同位素標(biāo)記的C1q與滅活的血清標(biāo)本混合，再加抗體致敏的綿羊紅細(xì)胞，溫育后離心，檢測紅細(xì)胞上的放射活性。紅細(xì)胞的放射活性與免疫復(fù)合物的量呈負(fù)相關(guān)。

　　2.補(bǔ)體試驗(yàn)本法的原理類似補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。將一定量的補(bǔ)體(多為混合豚鼠血清)與滅活的待檢血清混合溫育，反應(yīng)后加入致敏綿羊紅細(xì)胞。如出現(xiàn)溶血表示血清中沒有CIC存在;不溶血說明標(biāo)本中有CIC存在醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。將血清標(biāo)本做不同稀釋，并與已知的熱聚合IgG作對照，可以計(jì)算出CIC的含量。本方法的靈敏度較高，且易于在一般實(shí)驗(yàn)室開展，不足之處是特異性較差。

　　3.膠固素結(jié)合試驗(yàn)?zāi)z固素(conglutinin)是牛血清中的一種正常蛋白，能與C3d特異性結(jié)合;體內(nèi)與補(bǔ)體結(jié)合的CIC都帶有C3d，因此膠固素可與CIC結(jié)合。用一定量的膠固素包被塑料管，往管中加入稀釋的血清標(biāo)本，溫育后再加入同位素標(biāo)記或酶標(biāo)記的抗人IgG抗體，最后檢測各管的放射活性或酶活性，計(jì)算CIC的含量。

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