臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料：志賀菌屬微生物檢驗(yàn)

　　臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料：志賀菌屬微生物檢驗(yàn)

　　1、標(biāo)本采集

盡可能在發(fā)病早期及在治療前采集新鮮糞便，選擇粘液膿血便，必要時(shí)可用肛拭子采集。

　　2、檢驗(yàn)方法及鑒定

　　(1)分離培養(yǎng)：取糞便(粘液或膿血部分)或肛拭標(biāo)本接種GN肉湯增菌及再進(jìn)行分離培養(yǎng)。一般同時(shí)接種強(qiáng)弱選擇性不同的兩個(gè)平板。強(qiáng)選擇性鑒別培養(yǎng)基可用沙門、志賀菌選擇培養(yǎng)基(SS);弱選擇培養(yǎng)基可用麥康凱或中國藍(lán)培養(yǎng)基。培養(yǎng)18-24小時(shí)后選取可疑菌落進(jìn)行下列鑒定。

　　(2)鑒定：

　　1)初步鑒定：挑選可疑菌落3-4個(gè)先用志賀菌屬多價(jià)診斷血清作試探性玻片凝集試驗(yàn)。將試探性凝集試驗(yàn)陽性的菌落至少接種2-3支KIA(克氏雙糖)和MIU(動(dòng)力、吲哚、脲酶)，經(jīng)35℃18-24小時(shí)，凡符合KIA：K/A、產(chǎn)氣-/+、H2S，MIU：動(dòng)力-、吲哚、脲酶-，氧化酶-，并結(jié)合試探性玻片凝集試驗(yàn)陽性結(jié)果可鑒定為志賀菌屬。

　　2)最后鑒定：增加甘露醇(+/-)、蔗糖(-/+)(宋內(nèi)志賀菌屬遲緩陽性)、檸檬酸鹽(-)、苯丙氨酸脫氨酶(-)、ONPG(β-半乳糖苷酶)及鳥氨酸脫羧酶(-)(宋內(nèi)志賀菌屬為陽性);用志賀菌屬的診斷血清作群型鑒定。A群痢疾志賀菌，甘露醇陰性，10個(gè)血清型。B群福氏志賀菌，有6個(gè)血清型和X、Y2個(gè)變種。C群鮑氏志賀菌，15個(gè)血清群。D群宋內(nèi)志賀菌，僅有一個(gè)血清型，有光滑型和粗糙型兩種菌落。

　　3、與大腸埃希菌的鑒別

　　(1)無動(dòng)力，不發(fā)酵乳糖，靛基質(zhì)陰性，賴氨酸陰性。

　　(2)發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外)。

　　(3)分解黏液酸，在醋酸鹽和枸櫞酸鹽瓊脂上產(chǎn)堿。

　　4、與類志賀鄰單胞菌和傷寒沙門菌的鑒別

　　可用動(dòng)力和氧化酶試驗(yàn)加以鑒別，志賀菌為陰性，而類志賀鄰單胞菌為陽性。

　　傷寒沙門菌硫化氫和動(dòng)力陽性，能與沙門菌屬因子血清凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集。