2015初級檢驗(yàn)技師考試：細(xì)菌培養(yǎng)基的組成成分

　　培養(yǎng)基的組成成分包括三大類：營養(yǎng)物質(zhì)、凝固物質(zhì)、抑制劑和指示劑。

　　(一)營養(yǎng)物質(zhì)

　　盡管不同的細(xì)菌對營養(yǎng)的要求不同，但細(xì)菌需要的營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)含有水、氮源、碳源、無機(jī)鹽類和生長因子等，常用的營養(yǎng)物質(zhì)如下：

　　1.蛋白胨：蛋白胨是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一，提供細(xì)菌生長繁殖所需要的氮源。是動物或植物蛋白質(zhì)經(jīng)酶或酸堿分解而成。植物胨和動物胨各有優(yōu)點(diǎn)，配制培養(yǎng)基常將兩者按一定比例混合使用，提高培養(yǎng)基的營養(yǎng)價值。蛋白胨易溶于水，遇酸不沉淀，不因受高溫而凝固，并為兩性電解質(zhì)有緩沖作用。但吸水性強(qiáng)，應(yīng)注意干燥密封保存。

　　2.肉浸液：是用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黃嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、無機(jī)鹽類等)。還有一些生長因子。肉浸液可為細(xì)菌提供氮源和碳源，但肉浸液中所含氮物質(zhì)過少而不能滿足細(xì)菌的需要，因此在制備培養(yǎng)基時應(yīng)再加入1%～2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。

　　3.牛肉膏：由肉浸液經(jīng)長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞，所以其營養(yǎng)價值低于肉浸液，但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。由于使用方便，常用于制備培養(yǎng)基。

　　4.糖類、醇類：為細(xì)菌生長提供碳源和能源。制備培養(yǎng)基所用的糖類、醇類有多種，常用的糖類有單糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、雙糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇類有甘露醇、衛(wèi)茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外，其他糖類和醇類主要用于鑒定細(xì)菌所做的發(fā)酵反應(yīng)。

　　5.血液：血液中既含有蛋白質(zhì)、多種氨基酸、糖類、無機(jī)鹽類等營養(yǎng)物質(zhì)，又能提供輔酶(如V因子)、血紅素(X因子)等特殊生長因子，所以培養(yǎng)基中加入血液用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌。另外，還可根據(jù)細(xì)菌在血液培養(yǎng)基中的溶血現(xiàn)象而進(jìn)行鑒定。

　　6.無機(jī)鹽類：提供細(xì)菌生長的各種元素，如：鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。用于制備培養(yǎng)基的無機(jī)鹽類有多種，其中最常用的有氯化鈉和磷酸鹽，前者對維持酶的活性、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外的滲透壓非常重要，后者是細(xì)菌良好的磷源，并在培養(yǎng)基中具有緩沖作用。

　　7.雞蛋和動物血清：雖然不是構(gòu)成培養(yǎng)基的基本成分，但卻是某些細(xì)菌生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，所以僅用于制備一些特殊的培養(yǎng)基，這些細(xì)菌直接從雞蛋和動物血清中獲取營養(yǎng)。如培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的雞蛋培養(yǎng)基和培養(yǎng)白喉?xiàng)U菌的呂氏血清培養(yǎng)基等。

　　8.生長因子：是細(xì)菌生長所必需的，但需要量很小。在制備培養(yǎng)基時，常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培養(yǎng)基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。

　　(二)凝固物質(zhì)

　　制備固體培養(yǎng)基時，需要在液體中加入凝固物質(zhì)。最常用的凝固物質(zhì)為瓊脂，特殊情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。

　　瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠，當(dāng)溫度達(dá)98℃以上時可溶于水，在45℃以下則凝固成凝膠狀態(tài)，是一種理想的固體培養(yǎng)基賦形劑。因其不被細(xì)菌分解利用，故無營養(yǎng)作用。

　　(三)抑制劑和指示劑

　　在制備培養(yǎng)基時常加入抑制劑和指示劑，這些并不是細(xì)菌生長繁殖所必需的物質(zhì)，而是由于選擇、鑒定及判斷結(jié)果的需要。

　　1.抑制劑：抑制劑必須具有選擇抑制作用，在制備培養(yǎng)基時加入一定種類的抑制劑，目的在于抑制非檢出菌(非病原菌)的生長，以利于檢出菌(病原菌)的生長。抑制劑的種類很多，可不同的目的選用不同的抑制劑。常用的有膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。

　　2.指示劑：在培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑，是為了便于觀察細(xì)菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)、中國藍(lán)等酸堿指示劑。美藍(lán)常用作氧化還原指示劑。

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