2010年醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課堂講義(第二十二講)

　　第二十二講 免疫診斷

　　免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)主要包括抗原、抗體的檢測(cè)以及免疫狀態(tài)的測(cè)定，可廣泛運(yùn)用于生物 學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域，也是臨床輔助診斷的重要手段。

　　一、抗原或抗體的檢測(cè)

　　(一) 基本原理

　　1. 特異性轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com

　　2. 可逆性

　　*親和力(affinity)和親合力(avidity)

　　3. 可見性(最適比例)

　　4. 一抗與二抗

　　(二) 血清學(xué)方法

　　1. 凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)是指顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成大小不等凝集塊的現(xiàn)象。

　　(1)直接凝集反應(yīng)

　　(2)間接凝集反應(yīng)

　　2. 沉淀反應(yīng) 沉淀反應(yīng)：指可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成肉眼可見沉淀物的現(xiàn)象。

　　(1)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

　　(2)雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

　　(3)免疫電泳

　　(4)免疫比濁

　　(三)免疫標(biāo)記技術(shù)轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com

　　1. 免疫熒光法 用熒光素標(biāo)記的抗體(抗原)與組織或細(xì)胞中的相應(yīng)抗原(抗體)結(jié)合，借助于熒光

　　顯微鏡或流式細(xì)胞儀對(duì)抗原(抗體)進(jìn)行鑒定或定位。

　　(1)直接法

　　(2)間接法

　　2. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 以固相載體吸附(稱為包被)已知的抗原或抗體，通過這些抗原(抗體)結(jié)合標(biāo)本中

　　的抗體(抗原)，再加入酶標(biāo)記的抗體或二抗，最后通過酶催化底物形成有色產(chǎn)物來檢測(cè) 標(biāo)本中的抗體或抗原。分為：

　　(1)間接法

　　(2)雙抗體夾心法

　　3. 放射免疫分析 以放射性核素標(biāo)記抗原，通過競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的原理，使標(biāo)本中待檢抗原與標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)

　　合有限的抗體，兩者比例的差別可造成結(jié)合相與游離相中放射性含量的變化。測(cè)定結(jié)合相 中的放射性強(qiáng)度，可推測(cè)標(biāo)本中待檢抗原含量。有液相法與固相法之分。

　　二、免疫細(xì)胞的測(cè)定

　　(一) 淋巴細(xì)胞的分離與類型鑒定轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com

　　1. 免疫細(xì)胞分離技術(shù)

　　(1)根據(jù)細(xì)胞的密度、黏附性能、表面標(biāo)志等，采用不同方法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、 淋巴細(xì)胞及不同亞群。

　　2. 淋巴巴細(xì)胞亞群的鑒定

　　(1)免疫熒光法(流式細(xì)胞術(shù))

　　(2)抗原肽-MHC 分子四聚體技術(shù)

　　(二) 免疫細(xì)胞功能測(cè)定

　　1. T 細(xì)胞功能測(cè)定

　　(1)T 細(xì)胞增殖試驗(yàn)

　　a. 3H-TdR摻入法

　　b. MTT 法

　　(2)細(xì)胞毒試驗(yàn)

　　a. 51Cr釋放法

　　b. 乳酸脫氫酶釋放法

　　c. 凋亡細(xì)胞檢查法

　　(3)細(xì)胞因子檢測(cè)

　　a. 生物活性測(cè)定法轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com

　　b. 免疫學(xué)檢測(cè)法

　　c. 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)

　　2. B 細(xì)胞功能測(cè)定

　　(1)B 細(xì)胞增殖試驗(yàn)

　　(2)抗體形成細(xì)胞測(cè)定

　　三、免疫學(xué)檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用

　　(一)疾病診斷

　　1. 感染性疾病

　　2. 免疫缺陷病

　　3. 自身免疫病

　　4. 超敏反應(yīng)性疾病

　　5. 腫瘤

　　(二)免疫學(xué)監(jiān)測(cè)

　　1. 輔助診斷

　　2. 療效判斷轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com

　　3. 病情分析

　　4. 預(yù)后判斷

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