2010年醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課堂講義(第二十二講)
第二十二講 免疫診斷
免疫學(xué)檢測技術(shù)主要包括抗原、抗體的檢測以及免疫狀態(tài)的測定,可廣泛運用于生物 學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域,也是臨床輔助診斷的重要手段。
一、抗原或抗體的檢測
(一) 基本原理
1. 特異性轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com
2. 可逆性
*親和力(affinity)和親合力(avidity)
3. 可見性(最適比例)
4. 一抗與二抗
(二) 血清學(xué)方法
1. 凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)是指顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成大小不等凝集塊的現(xiàn)象。
(1)直接凝集反應(yīng)
(2)間接凝集反應(yīng)
2. 沉淀反應(yīng) 沉淀反應(yīng):指可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成肉眼可見沉淀物的現(xiàn)象。
(1)單向免疫擴散試驗
(2)雙向免疫擴散試驗
(3)免疫電泳
(4)免疫比濁
(三)免疫標(biāo)記技術(shù)轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com
1. 免疫熒光法 用熒光素標(biāo)記的抗體(抗原)與組織或細(xì)胞中的相應(yīng)抗原(抗體)結(jié)合,借助于熒光
顯微鏡或流式細(xì)胞儀對抗原(抗體)進行鑒定或定位。
(1)直接法
(2)間接法
2. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 以固相載體吸附(稱為包被)已知的抗原或抗體,通過這些抗原(抗體)結(jié)合標(biāo)本中
的抗體(抗原),再加入酶標(biāo)記的抗體或二抗,最后通過酶催化底物形成有色產(chǎn)物來檢測 標(biāo)本中的抗體或抗原。分為:
(1)間接法
(2)雙抗體夾心法
3. 放射免疫分析 以放射性核素標(biāo)記抗原,通過競爭結(jié)合的原理,使標(biāo)本中待檢抗原與標(biāo)記抗原競爭結(jié)
合有限的抗體,兩者比例的差別可造成結(jié)合相與游離相中放射性含量的變化。測定結(jié)合相 中的放射性強度,可推測標(biāo)本中待檢抗原含量。有液相法與固相法之分。
二、免疫細(xì)胞的測定
(一) 淋巴細(xì)胞的分離與類型鑒定轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com
1. 免疫細(xì)胞分離技術(shù)
(1)根據(jù)細(xì)胞的密度、黏附性能、表面標(biāo)志等,采用不同方法分離外周血單個核細(xì)胞、 淋巴細(xì)胞及不同亞群。
2. 淋巴巴細(xì)胞亞群的鑒定
(1)免疫熒光法(流式細(xì)胞術(shù))
(2)抗原肽-MHC 分子四聚體技術(shù)
(二) 免疫細(xì)胞功能測定
1. T 細(xì)胞功能測定
(1)T 細(xì)胞增殖試驗
a. 3H-TdR摻入法
b. MTT 法
(2)細(xì)胞毒試驗
a. 51Cr釋放法
b. 乳酸脫氫酶釋放法
c. 凋亡細(xì)胞檢查法
(3)細(xì)胞因子檢測
a. 生物活性測定法轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com
b. 免疫學(xué)檢測法
c. 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)
2. B 細(xì)胞功能測定
(1)B 細(xì)胞增殖試驗
(2)抗體形成細(xì)胞測定
三、免疫學(xué)檢測方法的臨床應(yīng)用
(一)疾病診斷
1. 感染性疾病
2. 免疫缺陷病
3. 自身免疫病
4. 超敏反應(yīng)性疾病
5. 腫瘤
(二)免疫學(xué)監(jiān)測
1. 輔助診斷
2. 療效判斷轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng)校edu24ol.com
3. 病情分析
4. 預(yù)后判斷
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