初級檢驗(yàn)技士：碳水化合物代謝試驗(yàn)(3)

更新時(shí)間：2010-09-30 14:44:18 來源：|0

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　　初級檢驗(yàn)技士：碳水化合物代謝試驗(yàn)(3)

　　β-半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG試驗(yàn))

　　(1)原理：有的細(xì)菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，能分解鄰-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黃色的鄰-硝基酚，很低濃度也可以檢測。

　　(2)方法：從克氏雙糖鐵培養(yǎng)基上取菌，于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液，加入一滴甲苯并充分混勻，使酶釋放。將試管置37℃水浴5分鐘，加入0.25ml ONPG試劑，水浴20分鐘-3小時(shí)，觀察結(jié)果。

　　(3)結(jié)果：菌懸液呈現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng)，無色為陰性。一般在20-30分鐘內(nèi)顯色。

　　()應(yīng)用：可用于遲緩發(fā)酵乳糖細(xì)菌的快速鑒定，本法對于迅速及遲緩分解乳糖的細(xì)菌均可短時(shí)間內(nèi)呈現(xiàn)陽性。埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、哈夫尼亞菌屬、沙雷菌屬和腸桿菌屬等均為試驗(yàn)陽性，而沙門菌屬、變形桿菌屬和普羅威登斯菌屬等為陰性。