初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):化學(xué)發(fā)光自動(dòng)化免疫分析
初級(jí)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo):化學(xué)發(fā)光自動(dòng)化免疫分析 $lesson$
化學(xué)發(fā)光自動(dòng)化免疫分析
(1)原理:是將發(fā)光系統(tǒng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合,以檢測抗原或抗體的方法。其既具有免疫反應(yīng)的特異性,更兼有發(fā)光反應(yīng)的高敏感性。發(fā)光可分為三種類型:光照發(fā)光、生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光。
(2)化學(xué)發(fā)光免疫分析中的標(biāo)記物質(zhì)及類型
?、侔l(fā)光免疫分析反應(yīng)中直接參與發(fā)光反應(yīng)的標(biāo)記物;
②以催化作用或能量傳遞參與發(fā)光反應(yīng)的酶標(biāo)記物;有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP)。
?、垡阅芰總鬟f參與氧化反應(yīng)的非酶標(biāo)記物。最常用的有三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記物。
例題:化學(xué)發(fā)光免疫分析中以催化作用參與發(fā)光反應(yīng)最常用的酶標(biāo)記物:
A.HRP B.THB C.TMB D.OPD E.ALP
答案:AE
(3)化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型:
?、倩瘜W(xué)發(fā)光酶免疫測定(CLEIA):是采用化學(xué)發(fā)光劑作為酶反應(yīng)底物的酶標(biāo)記免疫測定。以過氧化物酶為標(biāo)記酶、以魯米諾為發(fā)光底物、并加入發(fā)光增強(qiáng)劑以提高敏感度和發(fā)光穩(wěn)定性。應(yīng)用的標(biāo)記酶也可以為堿性磷酸酶,固相載體為磁性微粒。
?、诨瘜W(xué)發(fā)光免疫測定(CLIA):是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的一類免疫測定方法。吖啶酯是較為理想的發(fā)光底物。魯米諾類和吖啶酯類發(fā)光劑等均是常用的標(biāo)記發(fā)光劑。
?、畚⒘W踊瘜W(xué)發(fā)光免疫分析:有兩種方法:一是小分子抗原物質(zhì)的測定采用競爭法;二是大分子的抗原物質(zhì)測定采用雙抗體夾心法。
?、茈娀瘜W(xué)發(fā)光免疫測定(ECLI):是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性發(fā)光反應(yīng),包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)部分。
(4)臨床應(yīng)用優(yōu)越性①敏感度高,甚至超過RIA;②精密度和準(zhǔn)確性好,可與RIA相比;③試劑穩(wěn)定無毒害;④測定耗時(shí)短;⑤測定項(xiàng)目多;⑥已發(fā)展成自動(dòng)化測定系統(tǒng),因此在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中可取代RIA。
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