初級檢驗技師輔導：熒光免疫自動化分析
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初級檢驗技師輔導：熒光免疫自動化分析 $lesson$
熒光免疫自動化分析
(1)時間分辨熒光免疫測定(TRFIA)：是一種非同位素免疫分析技術，它用鑭系元素標記抗原或抗體，根據鑭系元素螯合物的發(fā)光特點，用時間分辨技術測量熒光，同時檢測波長和時間兩個參數進行信號分辨，可有效地排除非特異熒光的干擾，極大地提高了分析靈敏度。
①分析原理：它主要使用長效熒光標記物(稀土金屬Eu、Tb、Sm、Dy)，在關閉激發(fā)光后再測定熒光強度的分析方法。
?、跁r間分辨信號原理：普通物質熒光光譜分為激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，在選擇熒光物質作為標記物時，必須考慮激發(fā)光譜和發(fā)射光譜之間的波長差，以防影響檢測結果的準確性。
?、劢怆x增強原理：它用具有雙功能基團結構的螯合劑，使其一端與銪(Eu)連接，另一端與抗體/抗原分子上的自由氨基連接，形成EU標記的抗體/抗原，經過免疫反應之后生成免疫復合物。由于這種復合物在水中的熒光強度非常弱，因此加入一種增強劑，來大大增強熒光信號。
(2)熒光偏振免疫測定(FPIA)：熒光素標記的抗原與標本中的抗原競爭結合特異性抗體，反應后用單一平面偏振的光源照射，熒光素被激發(fā)產生偏振熒光。偏振熒光強度與分子轉動的速度成反比。主要用于測定小分子藥物濃度。
(3)熒光酶免疫分析：是以堿性磷酸酶為標記用酶，以反應管作為固相載體，以4-甲基傘型酮磷酸鹽(4-MUP)為酶反應熒光基質。根據熒光計數儀記錄熒光強度來計算所測物質的濃度?？捎糜诟鞣N抗原抗體的檢測。
(4)臨床應用：可應用于多種物質的檢測：例如腫瘤標志物;激素;甲狀腺激素;鐵蛋白;HbsAg等。FPIA主要用于藥物濃度的檢測及分析：如葉酸、VB12、可卡因、利多卡因等。熒光酶免疫分析主要用于過敏原檢測以及特異性IgE檢測。
例題：時間分辨熒光免疫分析所用的標記物是：
A.FITC B.PE C.PEcy7 D.鑭系元素
答案：D