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臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料:ABO血型鑒定總結(jié)

更新時(shí)間:2013-02-28 09:01:50 來(lái)源:|0 瀏覽0收藏0

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摘要 臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料:ABO血型鑒定總結(jié)

  臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)資料:ABO血型鑒定總結(jié)

  1.AB0血型鑒定原理

  常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有:①正向定型:用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定:凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性,呈散在游離狀態(tài)為陰性。

  2.鑒定方法

  (1)生理鹽水凝集法:①玻片法:操作簡(jiǎn)單,適于大量標(biāo)本檢查,但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng);被檢查者如血清抗體效價(jià)低,則不易引起紅細(xì)胞凝集,因此,不適于反向定型。②試管法:由于離心作用可加速凝集反應(yīng),故反應(yīng)時(shí)間短,而且,借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密,促進(jìn)凝集作用,適于急診檢查。

  紅細(xì)胞亞型抗原性弱,如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí),易造成漏檢或誤定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此類錯(cuò)誤。

  玻片法凝集結(jié)果判斷:紅細(xì)胞呈均勻分布,無(wú)凝集顆粒,鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn):①呈一片或幾片凝塊,僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(++++)。②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊,有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(+++)。③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒,游離紅細(xì)胞約占1/2為(++)。④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察,每凝集團(tuán)中有5~8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為(+)。⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周圍有很多的游離紅細(xì)胞(±)。⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集,紅細(xì)胞均勻分布為(-)。

  (2)凝膠微柱法:是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標(biāo)本,用專用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化,定量加樣,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

  3.抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

  準(zhǔn)血清均采自健康人,并應(yīng)符合下述條件:①特異性:只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集,無(wú)非特異性凝集。②效價(jià):我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1:128以上。③親和力:我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s;抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s.凝集強(qiáng)度為3min時(shí),凝塊不小于1mm2.④冷凝集素效價(jià):在1:4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。

  4.血型鑒定操作時(shí)注意事項(xiàng)

  一般注意事項(xiàng):①所用器材必須干燥清潔、防止溶血,凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染,建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后,應(yīng)待其平衡至室溫后再用,用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序:一般先加血清,然后再加紅細(xì)胞懸液,以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng),收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾,一般在室溫20℃~24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn),而37℃條件,可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱,最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min,否則較弱凝集不能出現(xiàn),造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制,血型抗體可減弱或消失;血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難;新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體,且自身血型抗體效價(jià)又低,因而出生6個(gè)月以內(nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗體,可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。

 

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