臨床檢驗技師復(fù)習(xí)資料：斑點免疫層析試驗

　　臨床檢驗技師復(fù)習(xí)資料：斑點免疫層析試驗

　　(一)原理

　　斑點免疫層析試驗簡稱免疫層析試驗(ICA)，也以硝酸纖維素膜為載體，但利用了微孔膜的毛細血管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析一般。

　　(二)試劑和操作

　　免疫層析試驗以單克隆雙抗體夾心法為例。試驗所用試劑全部為干試劑，多個試劑被組合在一個約6mm×70mm的塑料板條上，成為一單一試劑條，試劑條上端(A)和下端(B)分別粘貼吸水材料，免疫金復(fù)合物干片粘貼在近下端(C)處，緊貼其上為硝酸纖維素膜條。硝酸纖維素膜條上有兩個反應(yīng)區(qū)域，測試區(qū)(T)包被有特異抗體，參照區(qū)(R)包被有抗小鼠IgG.

　　測定時將試紙條下端浸入液體標(biāo)本中，下端吸水材料即吸取液體向上端移動，流經(jīng)C處時使干片上的免疫金復(fù)合物復(fù)溶，并帶動其向膜條滲移。若標(biāo)本中有待測特異抗原，其時可與免疫金復(fù)合物之抗體結(jié)合，此抗原抗體復(fù)合物流至測試區(qū)即被固相抗體所獲，在膜上顯出紅色反應(yīng)線條(T)。過剩的免疫金復(fù)合物繼續(xù)前行，至參照區(qū)與固相小鼠IgG結(jié)合(免疫金復(fù)合物中的單克隆抗體為小鼠IgG)，而顯出紅色質(zhì)控線條(R)。反之，陰性標(biāo)本則無反應(yīng)線條，而僅顯示質(zhì)控線條。

　　斑點免疫層析試驗在試劑形式和操作步驟上較前述的幾種免疫測定法都更為簡化，只用一個試劑，只有一步操作。