2013初級檢驗技師考試輔導:肥達氏反應操作規(guī)程
更新時間:2013-03-15 11:04:06
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摘要 肥達氏反應操作規(guī)程
[實驗原理]
本法是以傷寒"O","H";甲,乙,丙副傷寒分別培育,經(jīng)甲醛處理殺死后,做成菌液供 肥達氏應用,用以傷寒的輔助診斷。
[操作方法]
1、 取康氏試管,排成5 × 7形式,5 排分別編成O,H,A,B,C;
2、 另取大試管一支,加入病人血清0.25ml,用4.75ml生理鹽水作1:20稀釋,取2.5ml該稀釋血清于每排第一管內(nèi)分別注入0.5ml;
3、再取2.5ml生理鹽水把大試管內(nèi)血清作2 倍稀釋, 取2.5ml該稀釋血清于每排第二管內(nèi)分別注入0.5ml,以此類推 , 每排最后一管加0.5ml生理鹽水作陰性對照, 各稀釋度:1/20,1/40,1/80,1/160,1/320.然后于前六管中逐管加入1:10稀釋的各菌液0.5ml, 各終稀釋度:1/40,1/80,1/160,1/320,1/640.
4、充分振蕩混勻,于37℃放置16-20小時判定結果。
[結果判定]
根據(jù)凝集反應的強弱和有無,分別以4+,3+,2+,1+,-,記錄,以呈現(xiàn)(2+)的血清最高稀釋度為終點效價。
4+:液體清澈透明,菌體全部被凝成塊,沉于管底。
3+:液體較透明,大部分菌體被凝集而沉于管底。
2+:液體稍透明,管底有少量凝集沉淀物。
1+:液體較混濁,可見極少量凝集物。
-:液體混濁,細菌因重力下降于管底呈邊緣光滑圓點(與對照管相似)。
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