血氨測(cè)定方法-2018檢驗(yàn)技師考試精華考點(diǎn)
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血氨測(cè)定:有兩類血氨測(cè)定方法。
一類為兩步法,先從全血中分離出氨,再進(jìn)行測(cè)定,如擴(kuò)散法(已淘汰)和離子交換樹脂法;另一類為一步法,不需從全血中分離出氨直接測(cè)定,如酶法和離子選擇電極法。
(1)直接顯色測(cè)定法:在床旁取靜脈血2ml,以鎢酸沉淀蛋白后,用酚-次氯酸鹽顯色,參照標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算氨含量。如嚴(yán)格掌握實(shí)驗(yàn)條件,本法分析結(jié)果能滿足臨床要求。
(2)谷氨酸脫氫酶速率法:血漿中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在時(shí),經(jīng)谷氨酸脫氫酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率與血漿氨濃度成正比。
(3)離子交換法:去蛋白血漿標(biāo)本中的氨先被陽(yáng)離子交換樹脂吸附,再被分離出來(lái),用酚-次氯酸鹽顯色反應(yīng)求出氨含量。本法特異性好,精密度和準(zhǔn)確度均較高,已被作為血氨測(cè)定的參考方法。
(4)氨電極法:氨氣敏電極選擇性較高,故這類方法特異性好、準(zhǔn)確度較高,但是耐用性差,而且電極穩(wěn)定性受溫度、滲透壓、中介液等多種因素影響。
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