2018年檢驗(yàn)技師考試《微生物學(xué)及檢驗(yàn)》重要考點(diǎn)解析(五)
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培養(yǎng)基種類(lèi):
(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分,最常用的是肉浸液,俗稱(chēng)肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基礎(chǔ)培養(yǎng)基廣泛用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn),也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。
(2)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長(zhǎng)因子等特殊成分,供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長(zhǎng)因子的細(xì)菌生長(zhǎng)。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。
(3)鑒別培養(yǎng)基:利用細(xì)菌分解糖類(lèi)和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過(guò)指示劑的反應(yīng)不同來(lái)鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。
(4)選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長(zhǎng),有助于所選擇的細(xì)菌種類(lèi)的生長(zhǎng)。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門(mén)菌、志賀菌容易分離到。
(5)特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專(zhuān)性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營(yíng)養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì),如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對(duì)細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。
細(xì)菌的接種與分離技術(shù):
(1)常用的平板劃線分離法有以下兩種:
?、龠B續(xù)劃線分離法:此法主要用于雜菌不多的標(biāo)本。
?、诜謪^(qū)劃線分離法:本法適用于雜菌量較多的標(biāo)本。
(2)斜面接種法:該法主要用于單個(gè)菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細(xì)菌的某些特性。
(3)液體接種法:多用于一些液體生化試驗(yàn)管的接種。
(4)穿刺接種法:此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。
(5)傾注平板法:測(cè)定牛乳、飲水和尿液等標(biāo)本細(xì)菌數(shù)時(shí)常用此方法。
(6)涂布接種法:常用于紙片法藥物敏感性測(cè)定,也可用于被檢標(biāo)本中的細(xì)菌計(jì)數(shù)。
血瓊脂平板上的溶血分類(lèi):
(1)α溶血:菌落周?chē)囵B(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀;紅細(xì)胞外形完整無(wú)缺。
(2)β溶血:紅細(xì)胞的溶解在菌落周?chē)纬梢粋€(gè)完全清晰透明的環(huán)。
(3)γ溶血:菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化;紅細(xì)胞沒(méi)有溶解或無(wú)缺損。
(4)雙環(huán):在菌落周?chē)耆芙獾臅炄ν庥幸粋€(gè)部分溶血的第二圓圈。
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