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執(zhí)業(yè)藥師考試輔導(dǎo):藥物分析之柱色譜法

更新時間:2009-10-19 15:27:29 來源:|0 瀏覽0收藏0

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  1.吸附柱色譜

  色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管,下端用棉花或玻璃纖維塞住,管內(nèi)裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果。除另有規(guī)定外,通常多采用直徑為0.07~0.15mm的顆粒。色譜柱的大小,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時的流速,均按各品種項下的規(guī)定。

  (1)吸附劑的填裝

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  將吸附劑一次加入色譜管,振動管壁使其均勻下沉,然后沿管壁緩緩加入洗脫劑;或在色譜管下端出口處聯(lián)接活塞,加入適量的洗脫劑,旋開活塞使洗脫劑緩緩滴出,然后自管頂緩緩加入吸附劑,使其均勻地潤濕下沉,在管內(nèi)形成松緊適度的吸附層。操作過程中應(yīng)保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。

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  將吸附劑與洗脫劑混合,攪拌除去空氣泡,徐徐傾入色譜管中,然后加入洗脫劑將附著管壁的吸附劑洗下,使色譜柱面平整。

  俟填裝吸附劑所用洗脫劑從色譜柱自然流下,液面和柱表面相平時,即加供試品溶液。

  (2)供試品的加入

  除另有規(guī)定外,將供試品溶于開始洗脫時使用的洗脫劑中,再沿色譜管壁緩緩加入,注意勿使吸附劑翻起?;?qū)⒐┰嚻啡苡谶m當(dāng)?shù)娜軇┲校c少量吸附劑混勻,再使溶劑揮發(fā)去盡使呈松散狀,加在已制備好的色譜柱上面。如供試品在常用溶劑中不溶,可將供試品與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入。

  (3)洗脫

  除另有規(guī)定外,通常按洗脫劑洗脫能力大小遞增變換洗脫劑的品種和比例,分別分部收集流出液,至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時,再改變洗脫劑的品種和比例。操作過程中應(yīng)保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。

  2.分配柱色譜

  方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前,先將載體和固定液混合,然后分次移入色譜管中并用帶有平面的玻棒壓緊;供試品可溶于固定液,混以少量載體,加在預(yù)制好的色譜柱上端。

  洗脫劑需先加固定液混合使之飽和,以避免洗脫過程中兩相分配的改變。

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